• Découper des feuilles de Laurier-Cerise (Prunus Lauro-Cerasus) en morceaux dans un mortier

• Broyer les feuilles dans un peu d’eau physiologique ou de tampon de respiration pour mitochondries
• Filtrer l’extrait qui contient de l’acide cyanhydrique libéré par hydrolyse et le broyage

• Blocage de la respiration mitochondriale
• Ex.A.O.

• solution à 1,4% dans l’eau physiologique

• remplissage des boîtes pour immunodiffusion

• Diluer 1 blanc d’oeuf dans 200 ml d’eau distillée.
• Chauffer doucement en agitant constamment ; vers 70°C, la solution prend un aspect laiteux par coagulation de l’ovalbumine.
• Arrêter aussitôt le chauffage et filtrer une fois.

• TP analyse de matière organique
• Electrophorèse de protéines

• 1 volume de permanganate de potassiumà 2 %,
• 1 volume de carbonate anhydre de sodium à 4%.

• permet de révéler la chromatographie des sucres
• mélanger les deux produits au dernier moment en ne préparant que les quantités nécessaires

• butanol 1 : 1 volume additionné de bleu de bromophénol (jaune à pH<4,5), 1 g/litre de butanol
• acide acétique glacial : 0,5 volume
• eau distillée : 0,5 volume

• solvant de chromatographie de l’acide lactique et autres acides organiques

• 9 g de NaCl pour 1000 ml d’eau distillée

• multiples

• Na₃PO₄ à 50 g/l
• donc 1,5 g pour un flacon de 30 ml

• remplissage capsule de la sonde Schott utilisée par Jeulin et d’autres constructeurs

• Les hématies livrées (Biomérieux) sont à 50%.
• Réaliser une dilution à 2% soit 1 ml d’hématies pour 24 ml de tampon Véronal ou tampon PBS

• TP immunologie

• Eau distillée 1000 g
• Nitrate de Ca 1 g
• Nitrate de K 0.25 g
• Phosphate de K 0.25 g
• Sulfate de Mg (ou sulfate de Ca) 0.25 g
• Phosphate de fer 0.1 g

• cultures hors-sol
• cultures algues unicellulaires
• cultures in-vitro

• solution de phosphate monopotassique à 9,08 g de KH₂PO₄ par litre,
• solution de phosphate disodique à 9,47 g de Na₂HPO₄ par litre,
• mélanger 322 mL de la solution de phosphate disodique et 78 mL de la solution de phosphate monopotassique pour obtenir 400 mL de solution tampon à pH= 7,2,
• ajouter aux 400 mL, 800 mg de Sérum Albumine bovine (S.A.B.),
• ajouter enfin 45 g de mannitol et éventuellement 0,02 g de KCl et 0,02 g de MgCl₂.

• milieu d’extraction des mitochondries de coeur de boeuf (par exemple)

• 30 g de NaCl + 0,9 g de KCl + 1,9 g de CaCl₂ + 4,19 g de NaHCO₃
• pour 1000 ml d’eau distillée
• NB : ce milieu peut être oxygéné.

• milieu de conservation du nerf de crabe

• 7,65 g de NaCl, 0,724 g de Na₂PO₄ et 0,210 g de NaPO₄
• pour 1000 ml d’eau distillée

• lavages ou dilution de cellules

• 3,29 g de ferricyanure de potassium (K₃[Fe(CN)₆] dans 100 ml d’eau distillée

• réaction de Hill à partir de chloroplastes isolés

• 6,5 g de NaCl + 0,25 g de KCl + 0,12 g de CaCl₂ + 0,20 g de NaHCO₃

• multiples

• Diluer le rouge Ponceau à raison de 13 ml pour 90 ml d’eau distillée

• Coloration des bandes cellogel à électrophorèse.
• Coloration des dépôts d’immunodiffusion

• Sérum humain reconstitué comme le LYOTROL N de Biomérieux
• Gammaglobulines antitétaniques sur ordonnance
• Ajouter à 1 ml de sérum Lyotrol N, 0,1 à 0,3 ml de gammaglobulines antitétaniques selon l’intensité de la tache d’Ig désirée

• Electrophorèse des protéines sériques

• sulfite de sodium (Na₂SO₃) ou hyposulfite de sodium (Na₂S₂SO₃) en solution saturée
• attention de conserver le flacon bien fermé et plein pour éviter l’oxydation

NB : ajouter au fond du flacon des billes de verre au fur et à mesure qu’il se vide

• solution dite "zéro" permettant de régler le zéro des sondes à oxygène
• attention, ce produit est corrosif notamment l’hyposulfite

• faire 10 mL à une concentration de 400 mmoles (acide succinique C₄H₆O₄, PM=118 g),
• amener ensuite, au pHmètre, avec de la soude à 30%, l’acide succinique à pH=7,2.
• si l’on dispose de succinate de sodium, faire simplement une solution de succinate à 20 g/L (contrôler le pH et l’amener éventuellement à 7,2).

• substrat fonctionnel des mitochondries de coeur par exemple

• oxygénée, pour respiration en Ex.A.O. :

suspension à 5 g/l, à oxygéner au minimum 2 h avant le TP dans une éprouvette au fond de laquelle plonge un diffuseur d’aquarium aérant la suspension

• non oxygénée pour fermentation :

suspension à 15 g/l

• respiration cellulaire, Ex.A.O.
• fermentation, Ex.A.O.

• 7,65 g de NaCl + 0,724 g de Na₂PO₄ + 0,210 g de NaPO₄
• pour 1000 ml d’eau distillée

• dilution de l’agar-agar pour les boîtes test d’immunodiffusion

• 171 g de saccharose + 36,5 g de Na₂HPO₄ + 16,6 g de KH₂PO₄
• pour 1000 ml d’eau distillée

• milieu d’extraction de chloroplastes ou de mitochondries végétales

• Diluer le TRIS VERONAL à raison de 10ml pour 90 ml d’eau.
• La solution se conserve un mois environ au réfrigérateur et se réutilise.

• Trempage des bandes cellogel à électrophorèse.
• Remplissage de la cuve à électrophorèse.

• 1 g de vert de méthyl en poudre
• 55 ml d’eau distillée
• 45 ml d’acide acétique

• coloration des noyaux, des chromosomes et de l’ADN extrait des cellules