Fiches de préparation pour le laboratoire

Publié le 19 mars 2008

A

Extrait d’ acide cyanhydrique Utilisation
  • Découper des feuilles de Laurier-Cerise (Prunus Lauro-Cerasus) en morceaux dans un mortier
  • Broyer les feuilles dans un peu d’eau physiologique ou de tampon de respiration pour mitochondries
  • Filtrer l’extrait qui contient de l’acide cyanhydrique libéré par hydrolyse et le broyage
  • Blocage de la respiration mitochondriale
  • Ex.A.O.
Agar-agar Utilisation
  • solution à 1,4% dans l’eau physiologique
  • remplissage des boîtes pour immunodiffusion
Albumine du blanc d’oeuf Utilisation
  • Diluer 1 blanc d’oeuf dans 200 ml d’eau distillée.
  • Chauffer doucement en agitant constamment ; vers 70°C, la solution prend un aspect laiteux par coagulation de l’ovalbumine.
  • Arrêter aussitôt le chauffage et filtrer une fois.
  • TP analyse de matière organique
  • Electrophorèse de protéines

 

C

solvant Chromatographie des glucides

Utilisation
  • 1 volume de permanganate de potassiumà 2 %,
  • 1 volume de carbonate anhydre de sodium à 4%.
  • permet de révéler la chromatographie des sucres
  • mélanger les deux produits au dernier moment en ne préparant que les quantités nécessaires
solvant Chromatographie de l’acide lactique Utilisation
  • butanol 1 : 1 volume additionné de bleu de bromophénol (jaune à pH<4,5), 1 g/litre de butanol
  • acide acétique glacial : 0,5 volume
  • eau distillée : 0,5 volume
  • solvant de chromatographie de l’acide lactique et autres acides organiques

 

E

Eau physiologique Utilisation
  • 9 g de NaCl pour 1000 ml d’eau distillée
  • multiples
Electrolyte pour sonde oxymétrique Schott Utilisation
  • Na3PO4 à 50 g/l
  • donc 1,5 g pour un flacon de 30 ml
  • remplissage capsule de la sonde Schott utilisée par Jeulin et d’autres constructeurs

 

G

Globules rouges de mouton (=GRM) Utilisation
  • Les hématies livrées (Biomérieux) sont à 50%.
  • Réaliser une dilution à 2% soit 1 ml d’hématies pour 24 ml de tampon Véronal ou tampon PBS
  • TP immunologie

 

K

Liquide de KNOP Utilisation
  • Eau distillée 1000 g
  • Nitrate de Ca 1 g
  • Nitrate de K 0.25 g
  • Phosphate de K 0.25 g
  • Sulfate de Mg (ou sulfate de Ca) 0.25 g
  • Phosphate de fer 0.1 g
  • cultures hors-sol
  • cultures algues unicellulaires
  • cultures in-vitro

 

M

Milieu d’extraction des mitochondries Utilisation
  • solution de phosphate monopotassique à 9,08 g de KH2PO4 par litre,
  • solution de phosphate disodique à 9,47 g de Na2HPO4 par litre,
  • mélanger 322 mL de la solution de phosphate disodique et 78 mL de la solution de phosphate monopotassique pour obtenir 400 mL de solution tampon à pH= 7,2,
  • ajouter aux 400 mL, 800 mg de Sérum Albumine bovine (S.A.B.),
  • ajouter enfin 45 g de mannitol et éventuellement 0,02 g de KCl et 0,02 g de MgCl2.
  • milieu d’extraction des mitochondries de coeur de boeuf (par exemple)

 

N

Solution pour conservation nerf de crabe Utilisation
  • 30 g de NaCl + 0,9 g de KCl + 1,9 g de CaCl2 + 4,19 g de NaHCO3
  • pour 1000 ml d’eau distillée
  • NB : ce milieu peut être oxygéné.
  • milieu de conservation du nerf de crabe

 

P

PBS Utilisation
  • 7,65 g de NaCl, 0,724 g de Na2PO4 et 0,210 g de NaPO4
  • pour 1000 ml d’eau distillée
  • lavages ou dilution de cellules

 

R

Réactif de Hill Utilisation
  • 3,29 g de ferricyanure de potassium (K3[Fe(CN)6] dans 100 ml d’eau distillée
  • réaction de Hill à partir de chloroplastes isolés
Ringer Utilisation
  • 6,5 g de NaCl + 0,25 g de KCl + 0,12 g de CaCl2 + 0,20 g de NaHCO3
  • multiples
Rouge PONCEAU Utilisation
  • Diluer le rouge Ponceau à raison de 13 ml pour 90 ml d’eau distillée
  • Coloration des bandes cellogel à électrophorèse.
  • Coloration des dépôts d’immunodiffusion

 

S

Sérum pathologique (exemple) Utilisation
  • Sérum humain reconstitué comme le LYOTROL N de Biomérieux
  • Gammaglobulines antitétaniques sur ordonnance
  • Ajouter à 1 ml de sérum Lyotrol N, 0,1 à 0,3 ml de gammaglobulines antitétaniques selon l’intensité de la tache d’Ig désirée
  • Electrophorèse des protéines sériques
Solution zéro pour sonde oxymétrique Utilisation
  • sulfite de sodium (Na2SO3) ou hyposulfite de sodium (Na2S2SO3) en solution saturée
  • attention de conserver le flacon bien fermé et plein pour éviter l’oxydation

NB : ajouter au fond du flacon des billes de verre au fur et à mesure qu’il se vide

  • solution dite "zéro" permettant de régler le zéro des sondes à oxygène
  • attention, ce produit est corrosif notamment l’hyposulfite
Solution de succinate de sodium Utilisation
  • faire 10 mL à une concentration de 400 mmoles (acide succinique C4H6O4, PM=118 g),
  • amener ensuite, au pHmètre, avec de la soude à 30%, l’acide succinique à pH=7,2.
  • si l’on dispose de succinate de sodium, faire simplement une solution de succinate à 20 g/L (contrôler le pH et l’amener éventuellement à 7,2).
  • substrat fonctionnel des mitochondries de coeur par exemple
Suspension de levures Utilisation
  • oxygénée, pour respiration en Ex.A.O. :

suspension à 5 g/l, à oxygéner au minimum 2 h avant le TP dans une éprouvette au fond de laquelle plonge un diffuseur d’aquarium aérant la suspension

  • non oxygénée pour fermentation :

suspension à 15 g/l

  • respiration cellulaire, Ex.A.O.
  • fermentation, Ex.A.O.

 

T

Tampon PBS (pH=7,2)Utilisation
  • 7,65 g de NaCl + 0,724 g de Na2PO4 + 0,210 g de NaPO4
  • pour 1000 ml d’eau distillée
  • dilution de l’agar-agar pour les boîtes test d’immunodiffusion
Tampon P-saccharose Utilisation
  • 171 g de saccharose + 36,5 g de Na2HPO4 + 16,6 g de KH2PO4
  • pour 1000 ml d’eau distillée
  • milieu d’extraction de chloroplastes ou de mitochondries végétales
Tampon TRIS-VERONAL Utilisation
  • Diluer le TRIS VERONAL à raison de 10ml pour 90 ml d’eau.
  • La solution se conserve un mois environ au réfrigérateur et se réutilise.
  • Trempage des bandes cellogel à électrophorèse.
  • Remplissage de la cuve à électrophorèse.

 

V

Vert de méthyl acétique Utilisation
  • 1 g de vert de méthyl en poudre
  • 55 ml d’eau distillée
  • 45 ml d’acide acétique
  • coloration des noyaux, des chromosomes et de l’ADN extrait des cellules

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